Products

Modus quo effectus mutationum simultanearum cohaerent ad mutationem actionis enzymaticae, non est facile praevideri, quia non semper hi effectus linealiter additivi sunt.Hinc, characterisatio effectuum mutationum simultanearum amino acidorum residuarum quae substratum ligant, multum conferre potest ad intellectum specificitatis subiecti enzymorum.In beta-glycosidasa Spodoptera frugiperda (Sfbetagly), residua Q39 et E451 cum subiecto penitus se habent et hoc essentiale est ad definiendum specificitatem subiectam.Duplex mutantes Sfbetagly (A451E39, S451E39 et S451N39) praeparatae sunt a mutagenesis situ directae, in bacteria expressae et utentes chromatographia affinitatis purificatae.Hae enzymes notae sunt utentes p-nitrophenyl beta-galactoside et p-nitrophenyl beta-fucoside sicut subiecta.Ratio k cat/Km mutationum singularum et duplicum Sfbetagly continens mutationes situs directas in positionibus Q39 et E451 adhibita est ad demonstrandum effectum in libera energia pugionis ESdouble (incomplexi status enzyme-transitionis) duplicium mutationum (Gdouble daggerxy) non est summa effectuum ex unis mutationibus (Gdouble daggerx et Gdouble pugio).Haec differentia in pugione Gduplici indicat effectus unius mutationum ex parte aliudque.Hinc communis effectus semel tantum in Gduplice daggerxy numerat.Crystallographicae notitiae in beta-glycosidases ostendunt praesentiam vinculi hydrogenii bidentati residuis Q39 et E451 involventibus et eiusdem globi hydroxyli subiecti.Ideo notitiae thermodynamicae et crystallographicae suggerunt residua Q39 et E451 mutuam influentiam habere in suis mutuis interactionibus distent.